细胞与分子免疫学杂志

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金黄色葡萄球菌肠毒素阵列ELISA检测方法的建立及评价

作者:

郑玉玲, 欧阳譞, 黄文华, 刘鹏, 孔德聪, 姜永强, 韩雪莲, 律清宇*, 江华*(军事医学研究院微生物流行病研究所, 北京 100071)

出版年,卷期:

2019 第(35)卷 第(8)期 起止页码 695-701 页

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摘要:

目的 为实现对5种经典肠毒素的准确、 快速鉴定及分型, 本研究基于ELISA和芯片技术, 建立金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阵列ELISA(Array-ELISA)检测方法。方法 通过原核表达、 亲和纯化制备SE蛋白, 利用杂交瘤腹腔注射制备腹水, 纯化SE单克隆抗体, 通过ELISA对抗体的灵敏度、 特异性进行评价, 点制Array-ELISA阵列, 评价Array-ELISA对SE检测的灵敏度和特异性。结果 采用Array-ELISA, 在PBS中SE的检测限除葡萄球菌肠毒素C(SEC)为10 ng/mL外, 其余均为0.0001 ng/mL, 液态牛奶中SE的检测限为(0.001~10)ng/mL。在PBS和牛奶中SE检测的特异性均为100%, 各型SE之间无交叉反应。同时显示与肉毒毒素也无交叉反应。结论 成功建立Array-ELISA检测方法, 能够灵敏、 准确鉴定同一份样本中5种经典SE。