细胞与分子免疫学杂志

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胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠耐受性树突状细胞制备技术的优化

作者:

谭艳1, 田娅玲2, 宁丽常3, 蒋红梅1*(1贵州医科大学医学检验学院, 贵州 贵阳 550025; 2湖北民族大学附属民大医院检验科, 湖北 恩施 445000; 3南华大学第一附属医院检验科, 湖南 衡阳 421001)

出版年,卷期:

2019 第(35)卷 第(12)期 起止页码 1076-1081 页

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摘要:

目的 改良胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠脾脏来源耐受性树突状细胞(DC)的制备技术, 以获取高质量的实验细胞。方法 在提取脾脏单个核细胞过程中, 对制备单细胞悬液流程以及单个核细胞铺板后孵育时间进行改进, 培养初期加入核因子κB(NF-κB)寡核苷酸诱骗剂诱导为耐受性DC。显微镜观察细胞形态, 台盼蓝染色观察细胞活力, 流式细胞术检测细胞CD103(OX62)、 CD80和CD86表达, 噻唑蓝(MTT)法检测该DC刺激淋巴细胞的增殖能力。结果 DC的细胞活力>90%, OX62表达率>87.4%; 共刺激分子低表达, DC刺激淋巴细胞增殖能力低。结论 将CIA大鼠脾脏单个核细胞的制备方法进行改良, 经NF-κB寡核苷酸诱骗剂诱导可获得高活力、 高稳定性的耐受性DC, 且细胞纯度明显提高。