细胞与分子免疫学杂志

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TNF-α激活RhoA/ROCK信号通路增加单核细胞增生性李斯特菌感染内皮细胞的通透性

作者:

卢叶1, 2, 练志颖1, 杨昊1, 蒋清1, 邹钰1, 朱昱蓉1, 凌薇1, 袁琳1, 姜旭淦1, 陈盛霞1*(1江苏大学医学院, 江苏 镇江 212013; 2宜兴市人民医院检验科, 江苏 宜兴 214200)

出版年,卷期:

2020 第(36)卷 第(3)期 起止页码 193-197 页

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摘要:

目的 探讨大鼠肉瘤同源基因A/Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(RhoA/ROCK)信号通路在肿瘤坏死因子α(TNF-α)促进单核细胞增生性李斯特(Lm)感染致内皮细胞通透性升高的调控作用。方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为未感染细胞对照组、 TNF-α处理组(100 ng/mL TNF-α处理2 h)、 Lm 感染组(以MOI=10的Lm感染2 h, 加入庆大霉素杀菌0.5 h)、 TNF-α处理的Lm 感染组(Lm感染组细胞加入100 ng/mL TNF-α处理2 h)、 Y-27632联合TNF-α处理的Lm感染组(细胞用50 μmol/L ROCK抑制剂Y-27632处理30 min, 再如上进行Lm感染和TNF-α刺激)。Western blot法检测HUVEC的RhoA、 闭锁小带蛋白1(ZO-1)、 闭合蛋白(occludin)、 ROCK蛋白水平, 检测辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量分析HUVEC通透性变化, 用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的鬼笔环肽染色检测纤维型肌动蛋白(F-actin)细胞骨架的改变。结果 TNF-α可降低Lm感染的内皮细胞紧密连接蛋白ZO-1、 occludin的表达, 促进其通透性升高、 细胞骨架重排, 并上调RhoA和ROCK的表达。ROCK抑制剂Y-27632 可明显抑制TNF-α所致的HUVEC细胞骨架重排及通透性增高的作用。结论 TNF-α促进感染Lm的血管内皮细胞通透性增高可能通过RhoA/Rock信号通路调控。