细胞与分子免疫学杂志

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缺氧预处理的PMN-MDSC来源外泌体减轻胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)小鼠关节病变

作者:

褚小莉1, 陈林2, 张永臣1*(1南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)检验科, 江苏 南京 210009; 2南京医科大学附属逸夫医院检验科, 江苏 南京 211100)

出版年,卷期:

2021 第(37)卷 第(8)期 起止页码 728-735 页

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摘要:

目的 研究缺氧条件下多形核髓源性抑制细胞来源外泌体(PMN-MDSC-EX)对胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)的治疗作用。方法 通过牛2型胶原蛋白(Col2)和佐剂构建CIA小鼠模型,  并从小鼠脾脏中磁珠分选PMN-MDSC,  提取常氧(210 mL/L O2) 和缺氧(10 mL/L O2)条件下培养的PMN-MDSC上清中的外泌体。通过透射电镜观察其超微结构、 流式粒径分析测定其粒径、 Western  blot法检测CD9、 CD63、 热休克蛋白70(HSP70)、 钙连蛋白(calnexin)的蛋白表达鉴定PMN-MDSC-EX。将PMN-MDSC-EX加入体外CD4+ T细胞的增殖体系中观察其免疫抑制能力。CIA小鼠尾静脉注射PMN-MDSC-EX,  每3 d对小鼠进行关节评分,  HE染色检测小鼠关节病变情况,  ELISA测定小鼠血清中总IgG、 Col2抗体、 γ干扰素(IFN-γ)、 白细胞介素17(IL-17)水平。实时定量PCR检测正常和缺氧条件下PMN-MDSC-EX中miR-29a-3p和miR-93-5p的含量。结果 成功分选出CIA小鼠脾脏中的PMN-MDSC,  并制备了正常和缺氧条件下PMN-MDSC-EX。与正常氧含量PMN-MDSC-EX相比,  缺氧条件下PMN-MDSC-EX可更强的抑制CD4+ T细胞的增殖。缺氧PMN-MDSC-EX处理组CIA小鼠足趾红肿程度,  临床评分,  关节破坏程度都明显减低,  血清中总IgG、 Col2抗体、 IFN-γ、 IL-17水平也明显降低。与正常氧含量PMN-MDSC-EX相比,  缺氧条件下PMN-MDSC-EX中miR-29a-3p和miR-93-5p的含量更高。结论 缺氧条件下PMN-MDSC-EX免疫抑制能力更强,  可以更有效地缓解CIA小鼠的发病。