细胞与分子免疫学杂志

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N-乙酰半胱氨酸通过阻断Nrf2/Keap1通路抑制H2O2处理的佐剂性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖

作者:

杨珺1, 黄焱平1, 刘梅梅1, 汪陶荣2, 张晔2, 周文瀚3, 瞿子庭3, 陈晓宇2*(1安徽医学高等专科学校形态学实验中心, 安徽 合肥 230061; 2安徽医科大学形态学实验中心, 3安徽医科大学临床医学院, 安徽 合肥 230032)

出版年,卷期:

2021 第(37)卷 第(8)期 起止页码 687-692 页

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摘要:

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对低浓度过氧化氢(H2O2)处理的佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维细胞样滑膜细胞(AA-FLS)增殖的影响及机制。方法 SD大鼠分为正常对照组和模型组(均为10只), 模型组采用足趾皮下注射Freund完全佐剂造模, 28 d后处死大鼠。硫代巴比妥酸法检测血清丙二醛(MDA)含量、 羟胺法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性, 比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性, 免疫组织化学染色法检测踝关节滑膜组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、 Kelch 样ECH相关蛋白1(Keap1)蛋白表达; 体外培养和鉴定AA-FLS, CCK8法检测(0、 0.3、 0.9、 3、 10、 30、 90、 180)μmol/L NAC对5 μmol/L H2O2处理的AA-FLS活力的影响, 采用MitoSOX 线粒体活性氧荧光探针检测AA-FLS中线粒体活性氧(ROS)含量, Western blot法检测(0、 3、 10、 30)μmol/L NAC对低浓度H2O2处理AA-FLS的Nrf2、 Keap1蛋白表达的影响。结果 与正常对照组比较, AA模型大鼠血清MDA水平增加、 SOD、 GSH-Px水平降低, 滑膜组织中Nrf2表达升高、 Keap1表达降低; 免疫细胞化学染色证实分离培养的细胞是AA-FLS, NAC可浓度依赖性抑制H2O2处理的AA-FLS增殖, 且线粒体ROS含量下降, Nrf2、 Keap1蛋白表达降低。结论 NAC可抑制H2O2处理后的AA-FLS增殖, 其机制可能与阻断Nrf2/Keap1通路有关。