细胞与分子免疫学杂志

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miR-16-5p靶向抑制CXCL10表达减轻脂多糖诱导的HK-2人肾小管上皮细胞损伤

作者:

程创, 石中全*(重庆三峡医药高等专科学校基础医学部, 重庆 404120)

出版年,卷期:

2022 第(38)卷 第(3)期 起止页码 218-223 页

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摘要:

目的 探讨微小RNA-16-5p(miR-16-5p)对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞损伤和CXC趋化因子配体10(CXCL10)表达的影响。方法 体外培养HK-2人肾小管上皮细胞,  采用LPS诱导模拟急性肾损伤,  细胞分为对照组、 LPS组、 LPS联合miR-NC组和LPS联合miR-16-5p 组。实时荧光定量PCR分析miR-16-5p的表达,  噻唑蓝(MTT)比色法检测HK-2细胞的相对存活率,  ELISA检测培养细胞上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 白细胞介素6(IL-6)和IL-12的含量,  二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测活性氧(ROS)水平,  试剂盒检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量,  流式细胞术检测细胞凋亡率,   Western blot法检测CXCL10以及凋亡相关胱天蛋白酶3(caspase-3)和caspase-9的蛋白表达水平。生物信息学预测miR-16-5p和CXCL10相互作用靶点,  双荧光素酶报告基因实验验证miR-16-5p和CXCL10的靶向关系。结果 与对照组相比,  LPS组HK-2细胞miR-16-5p表达、 相对细胞存活率和SOD含量均明显降低,  而ROS 水平、 MDA、 TNF-α、 IL-6和IL-12的含量以及细胞凋亡率、 CXCL10、 caspase-3和caspase-9的蛋白表达均明显升高; 与LPS组相比,  过表达miR-16-5p逆转以上各指标变化。miR-16-5p能够靶向调控CXCL10的表达。结论 过表达miR-16-5p靶向抑制CXCL10的表达减轻LPS诱导的HK-2肾小管上皮细胞损伤。