细胞与分子免疫学杂志

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低氧通过上调内皮含PAS结构域蛋白1(EPAS1)表达促进人K562细胞向红系分化

作者:

高瞻1, 2, 肖军2, 李小薇2, 李翠莹1, 2*(1安徽医科大学空军临床学院, 北京 100142; 2空军特色医学中心输血科, 北京 100142)

出版年,卷期:

2022 第(38)卷 第(6)期 起止页码 494-500 页

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摘要:

目的 探讨低氧条件下编码缺氧诱导因子2α(HIF-2α)的内皮含PAS结构域蛋白1(EPAS1)基因在K562人红白血病细胞向红系分化中的作用。方法 将K562细胞分为常氧对照组、 常氧诱导组(40 μmol/L氯化血红素和0.1 ng/mL阿糖胞苷诱导)、 低氧对照组(50 mL/L O2)、 低氧诱导组。培养5 d后收集细胞,  流式细胞术分析CD235a+CD71+细胞比例,  联苯胺染色检测血红蛋白合成,  CCK-8法检测细胞增殖,  实时定量PCR检测EPAS1、 胰岛素受体底物2(IRS2)、 γ珠蛋白(γ-globin)mRNA表达,  Wester blot法检测上述基因蛋白表达,  分析低氧对K562细胞红系分化的影响; 使用短发夹RNA(shRNA)敲低EPAS1,  分析常氧及低氧下实验组(sh-EPAS1组)和对照组(sh-Control)红系分化的差异,  明确EPAS1对K562细胞红系分化的作用。结果 与常氧诱导组相比,  低氧诱导组CD235a+CD71+阳性细胞显著增加,  合成血红蛋白增多,  EPAS1、 γ-globin、 IRS2表达明显上升,  红系分化程度更高; 与sh-Control相比,  sh-EPAS1组CD235a+CD71+阳性细胞减少,  合成血红蛋白降低,  细胞增殖能力下降,  EPAS1、 γ-globin、 IRS2表达显著降低,  红系分化受阻。结论 低氧能显著上调K562细胞EPAS1表达,  促进细胞向红系分化。