细胞与分子免疫学杂志

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干扰miR-29a抑制氧糖剥夺/复氧诱导的大鼠H9c2心肌细胞线粒体融合与分裂

作者:

熊霞霞1, 熊卫平2*, 李林沅2, 杜娟1, 王道庄3, 王旭4(1四川省妇幼保健院PICU, 四川 成都 610000; 2四川省妇幼保健院儿童心脏中心, 四川 成都 610000; 3四川省人民医院心胸外科, 四川 成都 610000; 4北京阜外心血管病医院小儿心脏中心, 北京 100032)

出版年,卷期:

2022 第(38)卷 第(11)期 起止页码 998-1004 页

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摘要:

目的 探讨干扰miR-29a对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的心肌细胞线粒体融合与分裂的影响。方法 将H9c2细胞分为正常对照组、模型组、阴性对照组和miR-29a干扰组。采用OGD/R法诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤模型, 阴性对照组细胞转染anti-NC, miR-29a干扰组转染anti-miR-29a, 正常对照组细胞不转染。反转录PCR检测miR-29a干扰效率, CCK-8法检测细胞增殖倍数, 流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化, 试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量, Western blot法检测Bcl2相关X蛋白(BAX)、Bcl2拮抗剂/杀伤因子(BAK)、胱天蛋白酶9(caspase-9)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、视神经萎缩蛋白1(OPA1)、磷酸化的胞外信号调节激酶(p-ERK)和磷酸化的线粒体动力蛋白相关蛋白(p-Drp1)水平。结果 与OGD/R组比较,  anti-miR-29a处理的OGD/R组H9c2细胞miR-29a表达水平显著降低, 细胞增殖倍数显著增高, 细胞凋亡率显著降低, SOD含量增高, MDA和LDH含量降低, 线粒体膜电位显著增高, BAX、BAK、caspase-9、Fis1、Mfn1、Mfn2、OPA1、p-ERK和p-Drp1蛋白水平均显著降低。结论 干扰miR-29a表达可促进OGD/R诱导的H9c2细胞增殖, 抑制细胞凋亡, 降低线粒体氧化应激水平及增强线粒体膜电位, 抑制心肌细胞线粒体过度融合与分裂。