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干扰IGF2BP2下调MYC表达抑制结直肠癌细胞增殖、 迁移并促进肿瘤免疫
作者:
刘天玥1, 韩晨颖1, 胡尘辰1, 毛司懿2, 孙元杰1, 杨舒雅1*, 杨琨1*(空军军医大学基础医学院: 1免疫学教研室, 2学员四大队, 陕西 西安 710032)出版年,卷期:
2023 第(39)卷 第(4)期 起止页码 303-310 页附件类型大小:
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目的 探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)对结直肠癌细胞增殖、 迁移能力和肿瘤免疫微环境的影响及其可能的分子机制。方法 使用癌症基因图谱(TCGA)数据库分析结直肠癌及癌旁组织的IGF2BP2和MYC表达水平。采用RNA干扰技术(RNAi)沉默HCT-116和SW480人结直肠癌细胞的IGF2BP2表达, 实时定量PCR检测沉默效果。敲低IGF2BP2后, 集落形成实验、 CCK-8实验、 5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)实验检测细胞集落形成和增殖能力, TranswellTM实验检测细胞迁移能力, 实时定量PCR检测IGF2BP2、 MYC、 肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 转化生长因子β(TGF-β)、 白细胞介素10(IL-10)的mRNA表达。Western blot法测定IGF2BP2、 MYC的蛋白表达, RNA免疫共沉淀后实时定量PCR(RIP-qPCR)检测HCT-116细胞中IGF2BP2与MYC mRNA结合能力。结果 TCGA数据库结果表明, IGF2BP2和MYC在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织, 且IGF2BP2高表达的结直肠癌患者生存期更短。沉默IGF2BP2后, HCT-116和SW480细胞的活力、 增殖、 迁移能力降低。IGF2BP2敲低组MYC、 TGF-β、 IL-10的mRNA表达显著降低, 而TNF-α mRNA表达升高; MYC蛋白表达及mRNA稳定性均显著下降。RIP-qPCR结果表明IGF2BP2能够与MYC mRNA结合。结论 干扰IGF2BP2下调MYC表达抑制结直肠癌细胞增殖、 迁移并促进肿瘤免疫。