摘要：

目的 研究自然杀伤（NK）细胞来源外泌体的miR-30e-3p对食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞增殖、 凋亡和侵袭的影响。方法 从健康供体的外周血中分离和扩增NK细胞,  并分离NK细胞外泌体（EXO）进行鉴定。NK细胞外泌体与NEC细胞进行共培养,  随机分为Exo1和Exo2组。采用透射电子显微镜观察外泌体形态及大小。Western blot法检测外泌体凋亡相关基因2相互作用蛋白X(ALIX)、 抗肿瘤易感基因101(TSG101)、 CD81、 钙联蛋白(calnexin)表达。将miR-30e-3p模拟物（miR-30e-3p mimic）、 miR-30e-3p抑制物（miR-30e-3p inhibitor）及阴性对照（miR-NC）转入NK细胞,  并分离相应的外泌体与NEC细胞进行共培养。CCK-8法检测细胞增殖,  流式细胞术检测细胞周期,  异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡,  Transwell^TM侵袭实验检测细胞侵袭能力。实时定量PCR检测NCE细胞和外泌体中miR-23b、 miR-422a、 miR-133b、 miR-124、 miR-30e-3p和miR-99a的表达。结果NK细胞中CD56⁺CD3⁺细胞比例为（0.071±0.008）%,  CD56⁺CD16⁺细胞比例为（90.6±10.6）%。 从NK细胞分离的外泌体直径为30~150 nm,  且表达ALIX、 TSG101、 CD81,  不表达calnexin。NK细胞来源外泌体抑制NEC细胞增殖和侵袭、 增加细胞凋亡,  降低S期细胞比例并增加G1期细胞比例。过表达miR-30e-3p的NK细胞来源外泌体抑制NEC细胞增殖和侵袭,  并阻滞细胞周期和促进细胞凋亡,  敲低miR-30e-3p的NK细胞来源外泌体则相反。结论 NK细胞来源外泌体miR-30e-3p阻断人ESCC细胞的细胞周期,  抑制其增殖和侵袭并诱导其凋亡。