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2020-09

利用Cre-loxP系统研究细胞间mRNA的传递

目的 利用Cre-loxP重组酶系统研究mRNA在细胞间传递过程及意义。方法 构建和筛选稳定表达Cre重组酶的供体细胞及稳定表达loxP-DsRed-loxP-eGFP的受体细胞。将供、 受体细胞共培养或在TranswellTM中共培养,  设置单独受体细胞组为对照,  72 h后观察统计各...

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2020-09

群体感应分子3-氧代癸酰基高丝氨酸内酯(3-oxo-C10-HSL)抑制脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应

目的 探讨群体感应分子3-氧代癸酰基高丝氨酸内酯(3-oxo-C10-HSL)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法 RAW264.7巨噬细胞分为实验组、 对照组与空白组。实验组用不同浓度的3-oxo-C10-HSL与LPS共处理, 对照组加入DMSO与LPS, 空白组加入DM...

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2020-09

敲低Krüppel样因子4(KLF4)促进RAW264.7巨噬细胞向M1型极化

目的 研究敲低Krüppel样因子4(KLF4)基因对RAW264.7巨噬细胞极化的影响。方法 采用RNA干涉技术(RNAi)构建敲低KLF4的慢病毒载体, 转染RAW264.7巨噬细胞获得KLF4基因沉默的稳定细胞株。采用白细胞介素4(IL-4)刺激野生型、 KLF4敲低组和阴性对照组巨噬细胞, 反...

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2020-09

高氧抑制SIRT1和PGC-1α表达引起肺泡上皮细胞线粒体功能障碍

目的 探讨沉默配对型信息调节因子2同源物1-过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(SIRT1-PGC-1α)信号途径介导高氧对A549人肺泡上皮细胞线粒体功能的影响及其可能机制。方法 取对数生长期的人肺泡上皮细胞, 随机分为对照组和高氧组。对照组置于37℃、 50 mL...

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2020-09

miR-93-5p通过靶向FGD5促进三阴性乳腺癌细胞侵袭与迁移

目的 探讨miR-93-5p促进三阴性乳腺癌(TNBC)细胞侵袭与迁移能力的机制。方法 通过基因表达数据集(GEO)筛选出miR-93-5p及其靶基因面生殖发育不良基因5(FGD5), 实时荧光定量PCR检测细胞中miR-93-5p的相对表达量; Western blot法检测细胞中FGD5的相对表达量; Tr...

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2020-09

髓源性抑制细胞(MDSC)相关趋化因子MIP-1γ及其受体CCR1在肝癌荷瘤小鼠脾脏的表达及意义

目的 检测髓源性抑制细胞(MDSC)相关趋化因子在肝癌小鼠脾脏中的表达及其意义。方法 用流式细胞术检测脾脏MDSC的比例, 并采用流式细胞术分选出脾脏MDSC, 与活化的脾细胞共培养, ELISA检测共培养上清中IFN-γ的表达水平。制备小鼠原位种植性肝癌模型, 用蛋白芯片检测正常小鼠和荷瘤小鼠脾脏...

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2020-09

血红素激活含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性体诱导肾小管上皮细胞焦亡

目的 研究血红素是否通过活化肾小管上皮细胞含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性体引起焦亡而损伤肾脏功能。方法 使用血红素处理人肾小管上皮HK-2细胞, 通过扫描电镜观察细胞膜上是否有穿孔, 免疫荧光染色检测焦亡执行蛋白消皮素D氨基端蛋白(GSDMD-N) 的形成情况, 明确血红素是否引起人...

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2020-09

Ⅱ型固有淋巴样细胞(ILC2)通过分泌IL-13减缓类风湿性关节炎患者的发病进程

目的 研究Ⅱ型固有淋巴样细胞(ILC2)在类风湿性关节炎(RA)中的变化及可能的机制。方法 收集RA患者进行28个关节疾病活动度评分(DAS28), 并收集外周血标本。全自动血沉器检测血沉(ESR)、 免疫透射浊度法检测C反应蛋白(CRP)。免疫比浊法检测类风湿因子(RF)、 化学发光法检测抗环瓜氨酸肽抗体(A...

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2020-09

长链非编码RNA XIST在系统性红斑狼疮患者外周血CD4+ T细胞表达降低并与疾病活动度负相关

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)X连锁X染色体特异性失活转录本(XIST)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+细胞亚群中的表达,  并分析其临床意义。方法 募集50例SLE患者和30例健康人,  比较SLE组和健康对照组CD4+ T细胞中XIST表达情况。 根据系统性红斑狼...

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2020-09

小鼠视黄酸刺激基因8(Stra8)的原核表达及兔多克隆抗体的制备与鉴定

目的 原核表达小鼠视黄酸刺激基因8(Stra8)蛋白并制备兔抗小鼠Stra8多克隆抗体。方法 应用分子克隆法构建pET28a-Stra8原核表达重组质粒, 将该重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3), 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导Stra8蛋白表达, 采用组氨酸标签(His-TAG)...

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